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  • [희석액이란?] (멸균)생리식염수, 인산완충용액,TWEEN80
    실험방법 2023. 12. 19. 12:45

    안녕하세요!! 나칠라입니다.
    오늘은 희석액에 대해 설명하고, 만드는 방법, 사용법에 대해 알아보겠습니다.


    사실... 나, 나질라... 정... 정확하게 몰랐어서 다시 공부했따...ㅎ


    멸균 인산완충액(Phosphate-Buffered Saline, PBS), 멸균 생리식염수(Sterile Saline Solution)
    트윈 80(Tween 80)

    각각 다른 목적으로 사용되는 생화학적 용액입니다.

    각각의 상세 정보, 만드는 방법, 그리고 사용 방법을 설명하겠습니다.

    멸균 인산완충액 (PBS)

    설명

    PBS는 pH를 일정하게 유지하는 완충액으로, 세포 배양, 면역학적 연구, 단백질 용액의 희석 및 세척 등에 널리 사용됩니다.

    일반적으로 나트륨 클로라이드, 나트륨 인산염, 칼륨 클로라이드, 칼륨 인산염으로 구성됩니다.


    만드는 방법

    1. 재료준비
    증류수 +  수산화나트륨 +  나트륨 인산염+
    칼륨 클로라이드 + 칼륨 인산염

    2. 특정 농도로 용해시킨 후 pH를 조절.

    3. 멸균은 자외선 노출, 여과, 또는 오토클레이브 사용.

    식품공전


    사용법

    세포 세척, 효소 반응 용액의 희석, 항원-항체 반응 등에 사용됩니다.








    이~~~~~렇게 만들기 귀찮은뎅...누가 쓰겠어요...
    희석액 종류인 멸균생리식염수 OR 멸균인산완충액

    둘 중에 하나를 선택해서 사용

    하시면 됩니다👍





    이렇게 귀찮은 것을 왜 사용해요?

    사실 저는 사용을 안 한다고 했지만, 사용하시는 분들도 분명 있을 거란 말이죠?🤗

    그 이유는? - 실험 중, 최적의 PH농도를 맞춘 배지에서 세균의 대사산물로 인해서 배지의 PH가 바뀌기 때문에
    이를 최대한 억제해서
    "균 생육을 안정화"를 위해
    멸균인산완충용액을 사용합니다.
    (다른 버퍼용액도 이 때문)






    번외

    식품공학 전공 시절🌟 미생물학 책에서 나온

    FATTOM

    미생물 증균조건 중, 산도가 나오는데, 그만큼 미생물배양 시 중요하다~~ 그런 것이에요😘

    "FATTOM"은 미생물학, 특히 식품 미생물학에서 사용되는 용어로, 미생물의 성장에 영향을 미치는 여섯 가지 주요 요인을 나타내요!

    🍖🥪🍲1. Food (식품):
    미생물은 성장을 위해 식품이 필요합니다. 이는 탄수화물, 단백질, 지방, 비타민, 미네랄 등을 포함합니다.

    2. Acidity (산도):
    대부분의 미생물은 중성에서 약산성 환경에서 가장 잘 자랍니다. pH 값은 미생물의 성장에 큰 영향을 미칩니다.

    ex) 살모넬라 최적 PH= PH7~8
           장염비브리오 최적 PH=PH7.5~8.5

    🌡3. Temperature (온도):
    미생물은 다양한 온도에서 자랄 수 있으며, 각 종은 특정 온도 범위에서 최적으로 성장합니다.

    ⏳️⏰️4. Time (시간):
    미생물이 번식하고 성장하기 위해서는 적절한 시간이 필요합니다.

    5. Oxygen (산소):
    일부 미생물은 산소가 필요하고, 다른 일부는 산소 없이도 살 수 있습니다.

    💦🚿🌊6. Moisture (수분):
    미생물은 수분을 필요로 하며, 일반적으로 높은 수분 활성을 가진 환경에서 잘 자랍니다.

    이러한 요소들은 미생물의 성장과 생존에 중요한 역할을 하며, 식품 안전 관리 및 보존에서 특히 중요합니다. 이를 통해 식품의 부패를 예방하고 식품 안전을 유지하는 데 도움이 됩니다.






    멸균 생리식염수 (Sterile Saline Solution)

    상세 정보

    생리식염수는 주로 나트륨 클로라이드(NaCl)가 물에 용해된 용액으로, 인체의 염분 농도와 유사합니다. 의료 및 실험실 환경에서 다양하게 사용됩니다.


    만드는 방법

    일반적으로 1리터 기준 8.5g의 나트륨 클로라이드를 증류수에 용해시킨 후 멸균 처리합니다.


    식품공전
    사용 방법

    희석액으로 사용, 세포 배양 매체의 세척, 상처의 세척 등에 사용됩니다.

    만드는 방법이 정말 간단해서 저는 실험 시 이것을 많이 사용해요... 애용해요❤️









    트윈 80 (Tween 80)
    상세 정보

    트윈 80은 비이온성 계면활성제로, 실험실에서는 주로 용매의 표면장력을 낮추거나 세포막의 투과성을 증가시키는 데 사용됩니다.

    만드는 방법

    트윈 80은 일반적으로 상업적으로 구매되며, 특정 실험에 따라 다른 농도로 희석하여 사용합니다.
    (200ml + 2-3방울 후 멸균작업)

    사용 방법

    주로 세포 배양 매체에 첨가하여 세포막의 투과성을 증가시키거나, 효소 반응에서 용매로 사용됩니다.


    이 세 용액은 각기 다른 화학적 성질과 용도를 가지고 있으며, 실험 목적에 따라 적절하게 선택하여 사용해야 합니다.

    여기서 나오는 멸균작업은 121°C 15 min 오토클레이브 해주시면 됩니다.

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