[용수실험] colilert / colilert -18 정성검사 / 정량검사(방법만)

안녕하세요 나칠라입니다!
오늘은 정말 간단한 용수실험입니다.

colilert이것은 규제 승인까지 받았어요👍
자세한 내용은 차츰 해보겠습니다.

콜릴러트(Colilert) 시험은 수질 샘플에서 대장균군 및 대장균(E. coli)을 검출하는 방법으로, 다음과 같은 특징과 절차를 가지고 있습니다:)

⚠️colilert와 colilert-18은 배양시간이 다를 뿐,
실험절차는 같습니다!

 
 

colilert / colilert -18 란?

 

1. 검출 방법

콜릴러트는 ONPG와 MUG라는 두 가지 영양 지시물을 사용합니다. 이들은 대장균군과 대장균에 의해 대사 되는 특정 효소들에 의해 분해됩니다.
대장균군은 β-갈락토시다제를 사용하여 ONPG를 대사 시켜 무색에서 노란색으로 변화시킵니다.
대장균은 β-글루쿠로니다제를 사용하여 MUG를 대사 시켜 형광을 발생시킵니다.

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2. 시험 절차

콜린러트 시험은 간단하며 손으로 직접 처리하는 시간이 1분 미만입니다.
존재 여부와 정량 테스트 모두에 사용할 수 있으며, 단일 용량 포장은 미디어 준비 필요 없이 사용할 수 있도록 합니다.
품질 관리 절차는 약 15분 정도 소요됩니다.

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3. 결과 시간(정성일 때)

대장균군과 대장균을 동시에 24시간 이내에 감지할 수 있으며, 추가적인 확인 테스트가 필요하지 않습니다.

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4. 정확성과 특이성

콜릴러트는 대장균을 특정적으로 식별하여 비대상 유기체로 인한 불필요한 공공 통보를 방지합니다.
100mL당 최대 200만 개의 이질성 유기체를 억제할 수 있어 정확한 검사 결과를 제공합니다.

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5. 적용 범위

콜릴러트 시험은 식수, 폐수 및 원수 검사에 승인되어 있으며,
국제적으로도 승인되어 여러 국가에서 사용됩니다.

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6. 유통 기한과 보관

시험 키트는 실온에서 최대 12개월간 보관 가능하여 경제적입니다.

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7. 규제 승인

미국 EPA 승인을 받았으며 AOAC, IBWA, EBWA 등 국제 기준을 충족합니다.

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8. 간섭 및 품질 관리

  
잠재적 간섭으로는 높은 수준의 이질성 유기체와 과도한 염소가 있습니다.
각 콜릴러트 물량에 대해 통제 배양을 테스트하는 것이 품질 관리의 일부입니다.

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Colilert 실험방법(정성실험)
채취

시료 채수 방법: 1) 호스를 제거하고 수도꼭지를 멸균처리(화염)한다. 2) 수도꼭지를 틀어 5분이상 흘려보낸다. 3) 채수병 마개가 오염되지 않도록 개봉한다. 4) 채수병에 100ml 담아준다.

 실험

정성실험방법
colilert/colilert18

 

시약 샘플로 사용할 용수 100ml 인큐베이터(배양기) 비교기(증류수) UV램프( 클린벤치 비 지향)
윗면에 실금 가있는 곳을 똑 까주고 시료에 붓는다.
시약을 넣고 시약의 알갱이가 보이지 않을 때 까지 흔들어서 녹여준다.
	Colilert 총대장균군/대장균 - 배양 온도:   35°C+- 2 ºC - 배양 시간: 24시간 내외 분원성대장균군 - 배양 온도:   44.5°C - 배양 시간: 24시간 내외 즉, 분원성 대장균군 실험을 원한다면, 2개의 배양기에  다른 온도로 배양을 해야 됩니다. Colilert-18 총대장균군/대장균 - 배양 온도:   35°C+- 2 ºC - 배양 시간: 18시간 내외 분원성대장균군 - 배양 온도:   44.5°C - 배양 시간: 18시간 내외 즉, 배양기2개 사용 권장
	colilert comparator(비교기)와 비교했을때 색상 결과 판독: 무색 = 음성 노란색 = 총대장균 군 노란색/형광 = E. coli colilert-18 comparator(비교기)와 비교했을때 색상 결과 판독: 무색 = 음성 노란색 = 총대장균 군 노란색/형광 = E. coli
	colilert, colilert-18 (대장균) 샘플액이 노란색이고 UV등을 빛추었을 때, 탁하게 사진처럼 보이면 = 양성 샘플액이 덜 노란색이고 UV등을 빛추었을 때, 탁하지 않게 사진처럼 보이면 = 음성

 
 
 
 

colilert 만일 확실하지 않다고 생각하시면 28H 배양을 진행합니다. Colilert-18 최대22시간까지 가능.

 
 
 
 
 

궁금할만한 것들(Colilert)

권장보관 조건

2-30°C에서 빛을 피해 보관하세요.

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colilert 비교기

Colilert 비교기는 유색의 액체로 형광색을 판별하는 기준이 됩니다.
Colilert 비교기의 목적은 음성 테스트 결과로부터 최소 양성 결과를 구별하는 데 도움을 주는 것입니다.

24-28시간에 비교기와 동일하거나 진한 노란색 또는 형광색은 양성 테스트 결과로 간주합니다.

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colilert 파우더 색?

Colilert 시약 파우더는 흰색에서 옅은 황백색을 띠고 있어야 하며 건조하고 자유롭게 흘러내려야 합니다.

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24시간 지난 뒤에도 판독 가능?

네, 검체가 음성이라면 가능합니다.
만일 균을 접종한 Colilert 검체를
28시간을 초과해 배양한 경우,
노란색이 없다면 유효한 음성 테스트입니다.
28시간 이후의 노란색 결과는 유효하지 않으며 테스트를 반복하거나 검증해야 합니다.

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24시간 전에 판독이 가능?

네, 검체가 양성이라면 가능합니다.
균을 접종한 Colilert 검체는 대장균군과 대장균에 대해 24시간 전까지 양성을 나타내며,
대장균군과 대장균 양쪽 모두에 대해 유효한 양성 테스트입니다.

검체가 24시간 전까지 대장균군에 대해서만 양성이라면, 해당 검체는 대장균군에 대해 유효한 양성 테스트입니다.

그러나 해당 검체는 대장균 존재 여부를 결정하기 위해 더 오랜 기간 동안 배양해야 합니다
(최대 24시간 배양 가능, 총 배양 시간이 28시간을 넘으면 안 됨).

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왜 24-28시간만 해야 되는 거죠?

해당 시약 시스템은 비대장균군 ONPG 또는 MUG 양성 세균을 28시간 이상 억제하도록 설계되었습니다.

만일 배양 시간이 28시간을 초과하면, 이러한 세균이 Colilert 테스트 억제 시스템을 이겨내고 ONPG 또는 MUG와 반응할 수 있습니다.

배양 시간이 28시간을 초과한 경우, 오직 음성 결과만이 유효합니다.
양성 결과는 반드시 기존 방법으로 확인해야 합니다.

 

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정량화 가능?

ssap ga nl.
Quanti-Tray, Quanti-Tray/2000 또는 모든 유형의 시험관법에서 Colilert 테스트 결과를 정량화하실 수 있습니다.

 
 
 

 
 
 

궁금할만한 것들(Colilert-18) 

 

Colilert-18 테스트는 ISO인증이 되었는가?

네. 국제 표준화 기구(ISO)는 다중 시험관(최적확수) 법을 따르고 있는 ISO 9308-2:1990을 철회하고
이를 새로운 ISO 국제 표준인 9308-2:2012로 대체했습니다.

새로운 ISO 국제 표준은 Colilert-18/Quanti-Tray 방법을 따르며 물에서의
총대장균군 및 대장균을 검출하는 데 사용합니다.

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테스트의 검출 한계?

Colilert-18 테스트는 총대장균군과 대장균을 1 organism/100mL로 검출합니다.

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보관기한?

제조일로부터 최대 15개월

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테스트검체는 사전에 데워놓아야 하는가?

네, 정성검사 검체는 사전에 데워놓아야 하지만, Quanti-Tray 또는 Quanti-Tray/2000 검체는 그럴 필요가 없습니다.

P/A(정성검사)의 경우, 검체가 아직 33°C-38°C에 도달하지 않았다면

검체를 35°C 수조에 20분 -대장균, 총대장균군


44.5°C 수조에 7-10분 -분원성대장균군

이 사전 준비 시간은 18시간의 배양 시간에 포함됩니다(추가되는 것이 아님).

파우더의 색상과 농도는?

파우더는 옅은 황백색을 띠고 있어야 하며 건조하고 자유롭게 흘러내려야 합니다.
Colilert-18 테스트가 물 검체에 첨가되었을 때
약간의 옅은 색상이 관찰될 수도 있으나,
이는 테스트의 “판독성”에 전혀 지장을 주지 않습니다. 

18시간 이후 판독가능?

예, 접종된 Colilert-18 테스트 샘플을 실수로 18시간 이상 배양한 경우 결과는 추가 4시간 동안 안정적입니다(최대 배양 시간 22시간).

종속 영양 유기체는 배양 중에 억제됩니다. 22시간 후 음성 테스트는 유효하지만, 비교 값보다 크거나 같은 노란색은 유효하지 않으므로 반복하거나 확인해야 합니다.

보관방법

빛으로부터 2°C~25°C 떨어져 있습니다.

정량실험
(출처 idexx 공홈)

 

 

오늘 글의 출처 및 도움 받은 곳:
[[❞]](https://www.idexx.com/en/water/water-products-services/colilert/) [[❞]](https://www.idexx.com.au/en-au/water/water-products-services/colilert/) [[❞]](https://mb-labs.com/resources/colilert-works/) [[❞]](https://www.nemi.gov/methods/method_summary/5584/) [[❞]](https://www.nemi.gov/methods/method_summary/5585/).