[오토클레이브]

안녕하세요 나칠라 입니다.
오늘은 "오토클레이브" 사용방법과 주의할 점, 나름의 팁을 알려 드리도록 하겠습니다!
사용 중인 오토클레이브= [CORETECH]
※ CORETECH 유튜브 참고, 설명서 참고, 사용 후 후기 등으로 작성했습니다
 

오토클레이 = 고압증기멸균기 란?

밀폐된 용기 내에서 고온의 수증기를 이용하여 미생물, 포자등을 가열처리 하는 멸균 방법.
(여기서 따로 온도를 기재하지 않은 이유는 대상물품이나, 취급시약에 따라 온도와 시간이 다르기 때문입니다.)

★오토클레이브 대상물품 - 열, 증기, 압력, 습기 손상을 받지 않는 기구 (삼각플라스크, 멸균병 등)

☆대상제외 물품 - 고열에 약한 물품, 알약류, 증기가 통하지 않는 물질 등 (바셀린 등)

출처: CORETECH 유튜브

멸균 전 유의사항

1. 멸균 전 깨끗하게 세척된 기구를 오토클레이브에 넣기 WHY? 이물이 잔존하면 완전한 멸균이 어렵기 때문.

2. 오토클레이브 넣기 전 기구는 드라이오븐에 완벽하게 건조하기 WHY? 실험기구가 녹이 생길 수 있음.
 

조작방법

잠깐... 오토클레이브 작동 전에 알아두면 좋을 것들 몇 가지 알려드릴게요!

※메인 스위치는 ON 하기!

출처: CORETECH 유튜브

 
※다이얼 맞춰놓기 - 컨트롤러 설정온도보다 조금 높게 설정
다이얼 (설정 온도 이상으로 히터가 과열될 때 자동으로 히터 출력을 차단)

 
※수동밸브 만지지 않기(느슨하다면 꽉 조여주기 /  스팀 밸브가 열려있으면 내부 압력이 올라가지 않음)

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1. 온도/ 시간 설정하기.

\식품공전 제 8. 일반시험법 - 4. 미생물시험법 - 4.4 배지 및 시액 - 4.4.1 배지

 
원하는 멸균 온도와 시간은 식품공전이나 사용하시는 시약에 나와있으니 그것을 참고하시면 됩니다.

저는 제가 사용 많이 하는 PCA를 대표적으로 캡처했는데요, 식품공전에서도 121 ºC 15분이라고 나와있습니다. 

물론 시약통 뒷면에도 영어로 소ㅑㄹ랴랴랴 되어 있고  121ºC 15분이라고 나와있어요!
 

출처: CORETECH 유튜브

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2. 증류수 채워주기.

 
오토클레이브 내부에 증류수를 채워 넣어 주시면 됩니다. 

출처: CORETECH 유튜브

 
Q. 그냥 수돗물은 안되는가?
저도 귀찮아서 이러한 생각을 많이 했었는데, 업체에 연락해 보니 수돗물에는 불소와 염소가 포함되어 있어,
부식이 잘 일어난다고 합니다! 즉, 증류수를 넣어라~
 
Q. 얼마큼 증류수를 부어야 되나?
이거는 제가 직접 열선을 태워먹고 알게 된 양이기도 합니다! 업체에서 권장하는 양이기도 했구욯ㅎㅋㅋㅋ...ㅜㅜ
열선이 잠길 만큼, 히터커버가 잠겨 그 위에 물이 살짝 찰방 할 정도면 됩니다! 
 

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3. 멸균할 거 넣고 Run 눌러서  시작.

꽉 차지 않을 정도만 넣어서 시작!
(바스켓 더러움...주의..ㅎ)

run을 누르면 설정온도까지 올라가고, 온도가 유지되면서 설정 시간만큼 작동이 됩니다.
 

출처: CORETECH 유튜브

출처: CORETECH 유튜브

set을 누르면 온도와 시간을 설정할 수 있습니다.
방향버튼과 상하버튼을 사용해서 원하는 온도와 시간설정을 해주시면 됩니다.

그리고 동그란 원판 게이지는 압력을 알려주는 판이에요!
 

출처: CORETECH 유튜브

가동 종료가 되면 밑에 통에 수증기 물이 모이게 되면서, 증기압이 빠져나옵니다!
(정말 뜨거워요 조심하세요....)

• 모든 과정이 끝나고 물을 버려주셔야 돼요

 

출처: 나칠라 사진첩

출처: 나칠라 사진첩

출처: 나칠라 사진첩

이후 모든 과정이 끝나고 여기에 물이 차니깐 물을 한 번씩 버려줘야 됩니다.
 

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4. 멸균 샘플 회수하기.

 
모든 과정이 끝이 나면 오토클레이브가 삐삐삐삐삐삐 하고 신호를 줍니다. 

그러면 10분 정도 뒤에 샘플을 회수해서 사용하시면 됩니다:)
(온도가 80 ºC정도 되고, 압력이 0 atm이 되었을 때 오토클레이브 열기!! )

WHY? - 압력이 남아있는 상태에서 문을 열게 되면 압력차이 때문에 샘플이 터지거나 깨질 수 있어요!!
             (저는 배지를 감 쌓던 쿠킹포일이 날라갔...)

WHY? - 압력을 내려갔는데 온도가 높을 경우에는 뜨거운 증기 때문에 화상의 위험이 있습니다.
 

주의사항

• 내부열기에 의한 화상 주의
• 너무 많은 양의 샘플 적재 금지
• 수위 반드시 확인
• 증류수 사용

 

청소방법

 

• 바스켓  (1~2주 주기로 청소)

사용하다 보면 때가 생기고 주황빛이 돌기도 하거든요.
저는 싱크대로 들고 와서 수세미로 씻겨준답니다. 이후에 바짝 건조해줍니다!

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• 히터커버 (1~2주 주기로 청소)

이것도 마찬가지로 사용하다 보면 때가 생기고 주황빛이 돌아요
이 아이도 수세미로 살살 씻겨주고 바짝 건조해줍니다.

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• 내부 물갈이 (1주 주기로 청소)

제일 중요한 물갈이.

출처: CORETECH 유튜브

배수구를 통해서 물을 빼주면 됩니다.
바닥이 바로 물이 빠지는 공간이라면 축하드립니다. 정말 부럽습니다.

큰 물통을 가지고 와서 물을 받아주고 버리고를 반복하다 보면 내부에 증류수가 없어집니다.

내부 벽면은 물티슈로 가볍게 닦아주고 깨끗한 물이 나올 때까지 증류수를 부어서 씻어줍니다.(다른 방법이 있다면 당신의 말이 정답~★)

이후 이 친구도 자연건조 시켜 바짝 말려주고 다시 증류수로 한번 헹구고 오토클레이브에 증류수를 채워줍니다!
 

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• 오토클레이브 뚜껑 (수시로)

에? 뚜껑은... 청소하는 건가? 하실 수 있습니다.
뚜껑은 고무를 따로 분해하는 등 수고스러움은 없습니다.

그냥 고무패킹에 때가 끼이지 않게 물티슈로 슉 닦아주면 돼요!!

(때가 끼이거나 관리가 안되어 부식이 된 경우 제대로 멸균이 안되기 때문입니다.)
 

고장인가요?

• 오토클레이브가 온도만 올라가고 압력이 변화가 없어요

 -> 뚜껑이 잘 닫혔나 확인. 꼭지를 다 열고 다시 맞춰서 잠가 주세요
 -> 수동밸브 확인. 꽉 잠가야 압력의 변화가 생깁니다.
 

• 오토클레이브 내부에서 배지가 터졌어요... 어떻게 청소해야 돼요?

-> 이때는 배지가 내부에 굳었을 확률이 100%입니다....ㅎ 저도 알아요.... 네... 제가 그랬어요...

그럼 증류수를 히터커버까지 붓고 한 번 더 run을 돌립니다. 이후 종료되고 압력게이지가 "0"이 되면
배수구를 열어서 물을 빼줍니다! (이때 굳었던 배지들이 녹아서 다 나와요~)

이후 오토클레이브 청소법으로 청소해 주면 끝~
 

• 오토클레이브 열이 안 올라가요

-> 이거는 열선이 고장 난 것으로 보이는데요.... 업자를 부르시는 게 좋아요..
돈 아깝다고 스스로 고치면, 답이 없어요...ㅎ
 
여기까지 제가 실수를 통해 얻은 값진 경험의 결과이며 해당 회사 매뉴얼을 보고 정리한 내용입니다!